常规浓度范围
乳化体系:0.5%-5%(需根据油相比例调整)。
封闭液/稀释液:0.1%-1%。
核酸提取:1%-3%(需实验验证对目标核酸的影响)。
溶解方法
固体溶解:先加热至60℃以上(可溶于热水或热乙醇),搅拌至完全溶解后缓慢冷却。
预混储存:建议配制高浓度储备液(如10% Span-60溶液),使用时按需稀释。
注意事项
储存条件
密封避光保存于干燥环境,避免吸潮结块。
长期存放可能出现轻微分层,使用前需摇匀。
实验条件控制
温度敏感性:高温(>80℃)可能导致部分失活,建议配制时控温。
pH兼容性:pH 5-9范围内稳定,强酸/强碱条件易水解失效。
材料相容性
塑料容器:长期接触可能导致聚乙烯(PE)或聚丙烯(PP)容器溶胀,建议短期使用或改用玻璃/不锈钢容器。
蛋白干扰:过量可能吸附于抗体或抗原,需通过预实验优化浓度。
泡沫控制
低HLB值可能导致起泡,可通过添加少量消泡剂(如硅酮类)或低温操作缓解。
常见问题(FAQ)
Q:为何SPAN 60在免疫层析中常用作封闭液?
A:其温和的乳化能力可均匀包裹微孔板表面,减少非特异性结合位点,同时不破坏抗体活性。
Q:能否直接替代Triton X-100用于细胞通透?
A:不建议,因SPAN 60主要功能为乳化而非破膜,Triton X-100的脂质溶解性更强。
Q:使用Span-60后出现浑浊如何处理?
A:可能是油相比例不当或温度过低导致,需调整HLB值(如复配吐温80)或升温至溶解温度。
Q:Span-60是否会影响化学发光信号强度?
A:合理浓度下无显著影响,但过量可能吸附发光物质,需通过实验确定最佳添加量。
Q:能否与强阳离子表面活性剂(如十六烷基三甲氧硅烷)共用?
A:可能因电荷中和导致沉淀,建议避免直接混合。