Tween 20（聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸单酯）是一种非离子型表面活性剂，属于聚山梨酯（Polysorbate）家族，具有温和的去污性、低溶血性及优异的蛋白稳定能力。其分子结构中的亲水聚氧乙烯链与疏水月桂酸链平衡（HLB≈16.7），使其在体外诊断试剂中广泛用于封闭非特异性结合、稳定生物分子及优化反应体系。

作用机制

温和去污性：选择性裂解细胞膜或溶解脂质，释放目标分析物（如抗原、酶），同时保留蛋白天然构象。

封闭非特异性结合：阻断固相载体（如硝酸纤维素膜、微孔板）的非特异性吸附位点，降低背景干扰（如ELISA、层析试纸条）。

稳定蛋白与胶体颗粒：通过疏水链吸附至乳胶/胶体金表面，亲水链形成保护层，防止聚集（如免疫比浊法中的信号稳定性）。

低溶血性：相比其他聚山梨酯类（Tween 80溶血性最低），Tween 20溶血风险可控，适配全血/血清样本处理。

复性抗原表位：恢复部分变性抗原的天然构象，提升抗体识别效率（如Western Blot膜再生）。

应用场景

ELISA洗涤/封闭液：添加至洗涤液或封闭液，减少非特异性结合，提高信噪比。

免疫层析试纸条：预混于结合垫处理液，稳定胶体金标记抗体，抑制非特异性吸附。

细胞裂解液：作为温和去污剂，裂解细胞膜释放胞内靶标（如酶、核酸），保留蛋白活性。

乳胶颗粒稳定剂：加入乳胶微球悬浮液，防止颗粒聚集，提升浊度信号均一性（如CRP、PCT检测）。

蛋白复性缓冲液：用于Western Blot膜再生，恢复抗原表位，增强抗体结合效率。

通用使用范围：0.01%–1.0%（诊断试剂中常用0.05%–0.2%）。

注意事项

稳定性与储存：避免高温灭菌：高压灭菌可能导致降解，建议过滤除菌（0.22 μm滤膜）。

避光冷藏：长期暴露于光/热可能氧化变黄（轻微变色不影响功能）。

兼容性限制：避免与强氧化剂/重金属盐混合：如高浓度过硫酸铵、硫酸铜，可能引发分解或沉淀。

慎用防腐剂：可能降低苯扎氯铵、硫柳汞等防腐剂活性，需验证有效性。

溶血风险控制：全血检测中建议浓度≤0.1%，或替换为Tween 80（溶血性更低）。

常见问题

检测背景升高：可能是Tween 20浓度过高或封闭不足；建议降低至0.05%-0.1%，或增加封闭剂（如BSA）。

乳胶颗粒聚集：可能是与阳离子缓冲液反应；建议替换为中性/阴离子缓冲体系（如Tris-HCl）。

试剂浑浊或沉淀：可能是金属离子或pH超限；建议添加EDTA（1–5 mM）或调整pH至6–8。

蛋白活性抑制：可能是浓度过高导致部分变性；建议降低至0.05%以下，或替换为Pluronic F-68。

备注：Tween 20的平衡性能使其成为诊断试剂开发的“万金油”成分，但需通过预实验（如溶血测试、蛋白活性分析）优化浓度与配方。若需更高去污力，可复配Triton X-100（0.01%-0.05%）；若需更低溶血性，优先选择Tween 80或Pluronic F-68。