常规浓度范围
免疫层析:0.1%-0.5%(直接添加至反应体系)。
细胞通透:0.3%-1%(临用时稀释自30%储备液)。
样本裂解:1%-3%(需验证对目标蛋白的兼容性)。
注意事项
密封避光保存于阴凉处,避免高温或光照导致分解。
长期储存可能出现轻微分层,使用前需摇匀。
pH敏感性:强酸性(pH < 3)或强碱性(pH > 10)条件下易分解,需控制体系pH在5-8范围内。
氧化风险:避免与强氧化剂(如过氧化氢)直接混合。
塑料容器:长期接触可能导致溶胀,建议短期使用或改用玻璃/不锈钢容器。
抗体干扰:过量可能影响抗体结合,需通过预实验确定最佳浓度。
具有强起泡性,可通过添加消泡剂(如Triton X-100本身可部分抑制泡沫)或低温操作减少泡沫生成。
常见问题
Q:为何免疫层析中优先选择Triton X-100而非SDS?
A:Triton X-100为非离子型表面活性剂,不破坏蛋白质结构,保留抗原/抗体的免疫活性;而SDS(离子型)会导致蛋白变性,影响检测灵敏度。
Q:Triton X-100能否直接用于ELISA显色液?
A:需谨慎评估,因其可能干扰显色底物(如TMB)的氧化过程。建议优先选择AEROSOL OT等专用稳定剂。
Q:使用高浓度Triton X-100是否会导致背景升高?
A:可能因过度裂解细胞释放内源性物质或破坏基底膜导致非特异性信号,需优化浓度。
Q:低温下Triton X-100出现浑浊如何处理?
A:轻微浑浊为正常现象,恢复室温后搅拌即可溶解;若完全凝固,可能已降解,需更换新批次。
Q:能否与有机溶剂(如甲苯)共用?
A:Triton X-100与有机溶剂混溶性好,但需验证是否影响检测体系的稳定性(如pH变化)。