标记工艺
1、取100µL的时间分辨荧光微球溶液（1wt%），加入500µL活化缓冲液洗一次，离心去上清；
2、加入500µL活化缓冲液复溶微球，之后加入5µLEDC和10µLNHS（EDC和NHS原浓度均为100mg/mL，
稀释液为活化缓冲液，现用现配）于黑暗中旋转震荡30min，离心去上清；
3、加入500µL偶联缓冲液洗一次，加入500µL偶联缓冲液复溶微球，加入10-100µg抗体（抗体用量根
据项目具体情况变化）于黑暗中旋转震荡2h，离心去上清;
4、加入500µL封闭液复溶，于黑暗中旋转震荡1h，离心去上清；
6、加入500µL保存液洗一次，离心去上清；
7、加入100µL保存液复溶并于2-8℃保存。
注：离心转速推荐15000rpm（22000xg），离心时间15-20min。
注意事项
1、时间分辨荧光微球在使用之前应涡旋混匀或超声混匀，探入式超声是重悬微球最有效方式。
2、EDC对湿度非常敏感，受潮或结块后不能使用，EDC溶液使用应现用现配，NHS也应现用现配。
3、为了达到较优的偶联效果，所用的偶联反应缓冲液体系中应不含游离氨基，尤其Tris、甘氨酸、醋酸缓冲液不可使用。
4、反应缓冲液体系中加入痕量表面活性剂（Tween20等，不超过0.01%）可有效避免微球的团聚。
5、微球溶液浓度可根据项目信号值进行调整，T线标记微球推荐用量为3%~8%；C线标记微球推荐用量为1%~2%。
6、垫材质、垫预处理缓冲液、微球稀释液、活化剂用量和抗体比例等可根据项目性能进行优化；
本方案仅供研究初期参考，具体实验条件请研究人员依据自身项目进行优化
