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Cas14a1 是一种内切核酸酶,相比于其他的 Cas 蛋白,Cas14a1 蛋白的分子量普遍较小(400~700aa),其在tracrRNA:crRNA (或 sgRNA)的引导下,特异结合并切割靶标 ssDNA,且不受 PAM 位点的限制。当 Cas14a1 蛋白与sgRNA、靶标 ssDNA 结合后,激活附属切割活性,将体系中的任意序列 ssDNA 切碎,可用于靶标核酸的分子检测。
反应底物制备:DNA扩增产物可通过不同的方法制备,包括但不限于LAMP、PCR等方法。