常规浓度范围
封闭液/稀释液:0.1%-1%(如ELISA中封闭液常用0.5% PVP K30)。
颗粒分散体系:0.5%-3%(如乳胶颗粒悬浮液)。
酶稳定剂:0.1%-0.5%(需验证对酶活性的影响)。
核酸纯化:1%-5%(吸附酚类干扰物)。
溶解方法
直接溶解:易溶于水、乙醇,室温搅拌即可溶解,无需加热。
预混储存:建议配制10%储备液,避免长期储存滋生微生物。
注意事项
密封防潮保存于阴凉干燥处(建议15-25℃),避免吸潮结块或微生物污染。
长期储存可能轻微泛黄,不影响功能,但需避光。
温度敏感性:高温(>80℃)可能导致分子链断裂,失去成膜性。
pH兼容性:pH 3-10范围内稳定,强酸/强碱条件下可能降解。
塑料容器:长期接触可能溶胀聚苯乙烯(PS)容器,建议短期使用或改用玻璃容器。
蛋白干扰:过量可能吸附抗原/抗体,需通过预实验优化浓度。
配伍禁忌
强氧化剂:与高浓度过硫酸盐、次氯酸盐等可能发生氧化反应。
多价阳离子:与Al³⁺、Fe³⁺等结合可能形成沉淀。
常见问题
Q:为何PVP K30常用于ELISA封闭液?
A:其成膜性可覆盖微孔板表面疏水区域,减少非特异性吸附,同时不干扰抗体-抗原结合。
Q:使用后溶液变黏稠是否正常?
A:正常,PVP K30为高分子聚合物,浓度>1%时显著增加体系黏度,需根据检测需求调整用量。
Q:能否替代BSA作为封闭剂?
A:可以,但需验证封闭效果(PVP成本更低,但可能对某些高背景体系效果不如BSA)。
Q:PVP K30是否影响荧光检测?
A:低浓度(<0.5%)无显著干扰,但高浓度可能因光散射导致背景升高,需优化浓度。
Q:如何处理PVP K30溶解不完全的问题?
A:确保使用纯水或缓冲液,避免离子强度过高;可轻微加热(<40℃)加速溶解。
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